馬錢子的鑑別方法

理化鑑別
1.取胚乳切片，加硫釩酸1滴，顯藍紫色（番木鱉鹼反應）；另取切片加濃硝酸，顯橙紅色（馬錢子鹼反應）。
2.取該品粗粉1 g,加乙醇15 ml,冷浸2小時，濾液蒸乾，以1N鹽酸溶解，加氫氧化銨鹼化，氯仿提取，氯仿液再用1N鹽酸提取，酸液中加鋅粉及濃鹽酸，水浴加熱5分鐘，冷卻後加亞硝酸溶液1滴，即顯櫻紅色 （番木鱉鹼反應）．
3.薄層層析：⑴ 馬錢子鹼。⑵ 番木鱉鹼。⑶ 馬錢子（對照藥材）。⑷ 雲南馬錢（對照藥材）。⑸ 馬錢子（商品）。⑹ 制馬錢。
樣 品 液：取粉末0.5 g,加氯仿-乙醇（10∶1）混合液5 ml及濃氨水溶液0.5 ml,振搖5分鐘，放置2小時，濾液供試；
對照品液：另取番木鱉鹼，馬錢子鹼加氯仿溶解，製成每1 ml各含2 mg的混合液作對照溶液．
展 開：取10μl分別點樣於同一硅膠G板上，用甲苯-丙酮-乙醇-濃氨溶液展開．
顯 色：噴稀碘化鉍鉀試液,對照品顯兩橙色斑點，馬錢子鹼在下方，番木鱉鹼在上方，供試品顯相同的色斑。

含量測定
用高效液相色譜法測定．色譜條件與系統適用性試驗：用硅膠爲填充劑；正己烷－二氯甲烷一甲醇一濃氨試液（42.5:42.5:5:0.35）爲流動相；檢測波長爲254nm．理論板數按士的寧峯計算應不低於2000．
對照品溶液的製備：精密稱取士的寧對照品適量，加醋酸乙酷製成每1ml含0.4mg的溶液，供試品溶液的製備：取該品粉末（過三號篩）約0.5g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加氯仿25ml與濃氨試液1ml,密塞，輕輕振搖，稱定重量，放置24小時，再稱定重量，用氯仿補足減失的重量，充分振搖，濾過，精密量取濾液10ml,置分液漏斗中，用硫酸溶液（3→100）提取5次，每次15ml,合併硫酸液，加濃氨試液調節pH值至9～10,用氯仿提取5次，每次20ml,合併氯仿液，蒸乾，殘渣加醋酸乙酯溶解，轉移至10ml量瓶中，並稀釋至刻度，搖勻，即得．
測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各4μl,注人液相色譜儀，測定，即得．該品按乾燥品計算，含士的寧（C21H22N2O2）應爲1.20%～2.20%．

顯微鑑定
種子橫切面：種皮表皮細胞分化成單細胞毛，向一側斜伸，長500～ 1100μm，寬約 25μm以上，其部膨大，似石細胞狀，直徑約75μm，壁極厚，強木化，有縱長扭曲的紋孔，毛的體部肋狀木化增厚，胸腔斷面觀類圓形；種皮內層爲舫的棕色薄壁細胸，內胚乳細胞壁厚約25μm ，胞間連絲隱約可見，以碘液處理後較明顯，細胞內含脂肪油滴及糊粉粒。
粉末：灰黃色。
①非腺毛單細胞，大多斷裂，完整者長至1100μm，直徑25～63μm，壁強木化，基部似石細胞狀，壁極厚，紋孔縱裂縫狀，毛體部向一方倒伏，圓柱形，頂端鈍圓，有 5～18條肋狀增厚，易縱裂成裂片，宛如纖維，單個裂片直徑3～9μm，有的裂片再 2～ 3不完全縱裂。
②內胚乳細胞多角形、長多角形或類圓形，壁較厚或甚厚，隱約可見極細密的孔溝，有的胞間層呈細波狀彎曲，內含脂肪油滴、糊粉粒。此外有色素層（種皮內層細胞）。該品以個大飽滿、質堅肉厚、 色灰黃、有光澤者爲佳。《中華人民共和國藥典》1995 年版規定，該品以乾燥品計算，含番木鱉鹼應爲1.20%～2.20%。

化學鑑定
⑴取胚乳切片，加硫釩酸1滴，顯藍紫色（番木鱉鹼反應）；另取切片加濃硝酸，顯橙紅色。（馬錢子鹼反應）
⑵取馬錢子粗粉1g，加乙醇15ml，冷浸2h，濾液蒸乾，加1mol/L鹽酸溶解，以氧氫化銨試液鹼化，氯仿提取，氯仿液再以1mol/L鹽酸提取，酸液中加鋅粉及濃鹽酸，水浴加熱5min，冷後加亞硝酸溶液1滴，即顯櫻紅色。（番木鱉鹼反應）
（3）薄層層析：取粉末0.5g，加氯仿-乙醇（10:1)混合液5ml及濃氨水溶液0.5ml，振搖5min，放置2h，濾液供試，另取番木鱉鹼、馬錢子鹼加氯仿溶解，製成每1ml各含2mg的混合液作對照。各取10μl分別點樣於同一硅膠G板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨溶液（40:50:6:4) 展開15cm，取出晾乾，噴以稀碘化鉍試液，對照品顯兩橙色斑點，馬錢子鹼在下方，番木鱉鹼在上方，供試品顯相同的色斑。
【附註】：同屬植物雲南馬錢riana .的種子亦作馬錢子入藥。

化學成分
馬錢種子含多種生物鹼，可分爲三種類型：
①“正”系列（normal series ）生物鹼：番木鱉鹼（strychnine），馬錢子鹼（brucine），異番木鱉鹼（isostrychnine），異馬錢子鹼（isobrucine），番木鱉鹼N-氧化物（strychnine N－oxide），馬錢子鹼N-氧化物（brucine N－oxide），β-可魯勃林（β－colubrine），16-羥基-β-可魯勃林（16－hydroxy-β-colubrine），16-羥基-α-可魯勃林。
②“僞”系列（pseudo series ）生物鹼：僞番木鱉鹼（pseudo-strychnine），僞馬錢子鹼（pseudobrucine）。
③“N”-甲基僞”系列（N－methylpseudo series）
生物鹼：N-甲基-斷-僞番木鱉鹼（icajine），番木鱉次鹼（vomicine），N-甲基-斷-僞馬錢子鹼（no-vacine）。
種子所含生物鹼以“正”系列爲主[1-3]。種子經高溫加熱（220～260℃，3min），劇毒成分番木鱉鹼、馬錢子鹼含量明顯降低，而異番木鱉鹼、異馬錢子鹼、番木鱉鹼N-氧化物及馬錢子鹼N-氧化物含量增高。
根皮、根木質部含“正”系列生物鹼爲主，莖皮含“僞”及“N-甲基僞”系列生物鹼爲主，葉則含“N-甲基僞”系列生物鹼爲主。果皮、果肉均含番木鱉鹼，馬錢子鹼，4-羥基番木鱉鹼（4-hydroxystrychnine），番木鱉鹼N-氧化物，馬錢子鹼N-氧化物，僞番木鱉鹼，僞馬錢子鹼，N-甲基-斷-僞番木鱉鹼，番木鱉次鹼，N-甲基-斷-僞馬錢子鹼，果肉另含β-可魯勃林。果肉還含環烯醚單萜類（iridoid）化合物：馬錢子甙（loganin），馬錢子甙酸（lo－ganic acid），去氧馬錢子甙（deoxyloganin），馬錢子酮甙（ketolo－ganin），開鏈馬錢子甙（secologanin）。

長籽馬錢種子含多種生物鹼，可分爲三種類型：
①“正”系列生物鹼：4-羥基-3-甲氧基-番木鱉鹼（4- hydroxy－3－methoxystrychnine），番木鱉鹼，馬錢子鹼，4-羥基番木鱉鹼，番木鱉鹼N-氧化物，α-可魯勃林。
②“僞”系列生物鹼：僞番木鱉鹼，僞馬錢子鹼。
③“N-甲基僞”系列生物鹼：N-甲基-斷-僞番木鱉鹼，番木鱉次鹼，N-甲基-斷-僞馬錢子鹼及4-羥基-3-甲氧基-N-甲基-斷-僞番木鱉鹼（4－hydroxy－3－methoxy-N－methyl-sec－pseu－dostrychnine）。
種子所含生物鹼以“正”系列爲主[5]葉則含“N-甲基僞”系列生物鹼爲主。
此外，葉還含有N-氰基-斷-僞番木鱉鹼（N-cyano-sec－pseudostrychnine）及N-氰基-斷-僞馬錢子鹼（N－cyano-sec-pseu－dobrucine）